重组人α2b型干扰素的纯化与鉴定

采用单克隆抗体亲和层析一步纯化法对大肠杆菌表达的重组人a2b型干扰素(IFN－α2b)进行了纯化，然后利用凝胶过滤高压液相层析、SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳和N端25个氨基酸的序列测定等方法对纯化产品进行了鉴定，表明一步纯化的IFN—α2b达到95%以上的纯度，其比活性为2．54×108U／mg但重组IFN—α2b产品N端不均一，含有约30％的去Met分子和约70％的带Met分子。从蛋白质序列的水平上证实，本实验室用定位诱变法构建的IFN—α2b基因在大肠杆菌系统中得到了正确的表达。