THE CLONING AND PRELIMINARY CHARACTERIZATION OF A C18:0 A9 DESATURASE GENRE FROM MARINE MICROALGAE PA VLOVA VIRIDIS
绿色巴夫藻脂肪酸去饱和酶的克隆和初步研究

在高等植物中，Δ9 脂肪酸去饱和酶引入第一个双键到饱和的脂肪酸链中，导致单不饱和脂肪酸的形成。我们通过RT-PCR、RNA ligase mediated RACE (RLM-RACE) and Overlap-PCR方法从海洋微藻绿色巴夫藻中克隆到一个命名为PvfadA的脂肪酸去饱和酶候选基因。通过将PvfadA基因在大肠杆菌表达系统中成功表达，PvFadA可以特异性地将C18:0脂肪酸转变成C18:1脂肪酸。PvFadA的氨基酸序列中存在一个存在于acyl-ACP去饱和酶的特异性金属离子结合区段(D/E)X2HX-100(D/E)X2H。通过同源模建PvFadA的3D结构显示，其包含了11个α螺旋，其中α3、α4、α6和α7组成了一个4个螺旋桶的核心结构，预测其可能是酶的活性中心。PvFadA的3D结构类似于蓖麻和结核分枝杆菌H37Rv的acyl-ACP去饱和酶。