高温反向顺序测定

单链克隆DNA的反向测序是一个简单和快速的方法，这个方法可利用原来的DNA再进行反向顺序测定，从而达到校正和积累DNA数据的作用。由于反向测序的本质是双链测序，所得到的DNA顺序的图谱背景较深，伴有杂带，或在x光显影上是不清晰的。本文报道利用我们实验室所开发的热稳定性的Bst聚台酶系统，进行反向测序克服了这些缺点，获得的图谱可以和单链DNA模板测序的图谱相媲美。我们以nod D 487-mp 8 ss-DNA为模板进行反向测序，证明Bst聚合酶在65℃反应能得到满意的结果。