Detection of soil petroleum-degrading bacteria with fluorescence in situ hybridization technique
荧光原位杂交技术对土壤石油降解菌的检测

从辽河油田样品中筛选出一株高效石油降解菌，经鉴定为地衣芽孢杆菌。针对其16S rRNA设计寡核苷酸探针。荧光原位杂交(FISH)技术利用寡核苷酸探针检测特定细胞内的互补核苷酸序列。通过对纯菌和泥浆中地衣芽孢杆菌的FISH进行优化，得到泥浆中地衣芽孢杆菌的荧光原位杂交实验条件：样品固定时间17 h，杂交温度46 ℃，杂交时间3 h，杂交液中去离子甲酰胺浓度35%，冲洗缓冲液中与去离子甲酰胺对应的NaCl的浓度88 mmol·L-1。运用上述FISH技术监测生物泥浆反应器中地衣芽孢杆菌量的变化，并与泥浆中含油率的变化进行比较，二者的变化情况符合微生物降解石油的趋势，为监测含油污泥中微生物的变化提供了一种可行的技术。