Relationship between proliferating cell nuclear antigen gene expression amount and growth rate of Skeletonema costatum
增殖细胞核抗原基因表达量与中肋骨条藻生长的关系

对中国近海常见的赤潮藻-中肋骨条藻（Skeletonema costatum）生长相关的分子标记进行了研究，通过RT-PCR和RACE技术获得了其PCNA基因的部分序列，首次克隆测序得到了714bp的中肋骨条藻细胞色素b（Cytochrome b，Cyt b）基因序列。根据得到的PCNA与Cyt b基因序列，分别建立了检测中肋骨条藻PCNA与Cyt b基因的实时荧光定量PCR的标准曲线，并通过对已知浓度样品的检测证明了所建立标准曲线的准确性。以上述建立的方法为基础，研究了中肋骨条藻生长率与增殖细胞核抗原基因表达量之间的关系。结果发现，平均单细胞中PCNA表达量在培养的不同阶段变化很大，且变化趋势与生长率表现出良好的一致性，说明PCNA表达量与细胞分裂密切相关，体现了其作为细胞增殖指标的潜能；而Cyt b基因表达稳定，表达量变化很小，说明Cyt b基因是一个潜在的良好的内参基因。基于此，提出以PCNA为目的基因、Cyt b为内参基因，将PCNA基因的相对表达量（REQ）作为中肋骨条藻生长率的一个指标，并建立了实验室条件下PCNA相对表达量与中肋骨条藻生长率之间的关系式。