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生物物理学报 2001
IMAGING AND FLUORESCENCE DETECTION OF DNA SINGLE MOLECULEUSING NEAR-FIELD OPTICAL MICROSCOPY
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Abstract:
介绍了扫描近场光学(SNOM-Scanning Near-Field Optical Microscope)/原子力显微镜(AFM-Atomic Force Microscope)系统(SNO/AM)的工作原理。在AFM模式和SNOM模式下对DNA分子进行成像和荧光探测,得到了清晰的DNA单分子的形貌像和荧光像。由形貌圆像得到的DNA分子尺寸横向为20nm,高度为2nm,其中包含了探针形貌的影响。实验中采Tapping模式的AFM成像,样品经多次搜索扫描无明显损坏。AFM模式的分辨率优于1nm。SNOM模式下DNA分子形貌像和荧光像清晰,由近场荧光分布可以确定分子取向和浓度。用YOYO-1染料对λDNA分子进行染色和荧光探测。通过对DNA分子多个截面进行测量,分析染料 与DNA结合状态。