THE CONSTRUCTION OF X CHROMOSOME LIBRARY OF SPINY EEL (MASTACEMBELUS ACULEATUS)
刺鳅X染色体DNA文库的构建

刺鳅（Mastacembelus aculeatus）是具有明显X和Y异形性染色体分化的淡水鱼。本实验室通过显微切割（Microdissection）和兼并引物PCR（DOP-PCR）方法，从雌性刺鳅中期染色体分裂相中分离获得X染色体并扩增其DNA，利用T载体和电转化方法，建立了刺鳅X染色体DNA质粒文库。该文库插入片段的平均长度约为500bp，理论上包含X染色体98％以上的序列。当用荧光原位杂交（FISH）来验证文库的专一性时发现，在无竞争性DNA杂交条件下，整个X和Y染色体上都表现出强烈的杂交信号，并且常染色体上也出现一些随机散布信号；当含有竞争性DNA时，常染色体上的信号消失，仅性染色体上异染色质区域保留有较强信号。就此，本文对刺鳅性染色体上的序列类型进行了探讨。