荧光光谱校正的原理和方法(下)

四、校正曲线的探测方法(一)激发光谱校正曲线(激发光强度-波长曲线)1.温差电偶由于温差电偶在一定波段内不存在光谱特性,可在荧光分光光度计样品室中放置一个很灵敏的、具有石英窗口的热电偶,热电偶的后面连接一个灵敏检流计,当改变激发光单色器波长时,检流计上面读数的变化便是光源-激发光单色器组合体的强度-波长曲线。然后将表观激发光谱每一波长上的读数乘以激发光强度-波长曲线同一波长上的数值,以所得的数值对波长作图,便可得到真实的荧光激发光谱。但利用热电偶的探测方法,只有在光通量较强时才是可以的。因热电偶的电输出信号微弱。容易受各种外界因素干扰。