THE EXPRESSION AND PURIFICATION OF RNA POLYMERASE Ⅱ ZINC FINGER GENE FRAGMENT FROM BLEPHARISMA JAPONICUM AND PREPARATION OF POLYCLONAL ANTIBODY
赭纤虫RNA聚合酶Ⅱ锌指基因片段的表达、纯化及多克隆抗体的制备

以一种进化较为原始的单细胞真核生物日本赭纤虫(Blepharisma japonicum)大核基因组DNA为模板,PCR扩增 得到了RNA聚合酶锌指基因片段,并构建重组表达质粒pGEX-6p1-ZFbl,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,SDS- PAGE和Western blot分析证明目的蛋白得到了可溶性融合表达。用纯化的蛋白免疫新西兰兔,制备多克隆抗体。 Western印迹和ELISA鉴定结果表明抗体特异性较高,效价高达1:15000。