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用于膜片钳研究的乳鼠窦房结细胞的分离与鉴定

Keywords: 窦房结细胞,分离,膜片钳,实验研究

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目的比较“酶解+差速贴壁”法和“酶解+差速贴壁+5-溴脱氧尿嘧啶核苷(常规培养)”法体外分离培养乳鼠窦房结细胞,寻找可行的用于膜片钳实验的分离方法。方法取wistar乳鼠的窦房结组织,分别采用“酶解+差速贴壁”和常规培养法分离培养窦房结细胞,观察细胞形态结构、搏动频率、膜片钳实验难易程度及成功率。同样方法分离培养心房肌细胞作为对照。结果培养的窦房结细胞中梭形细胞最多、心房肌细胞中三角形细胞最多。两种方法分离的窦房结细胞中均为梭形细胞最多并均可记录到自发性动作电位,其中“酶解+差速贴壁”法分离的细胞活性更好,进行膜片钳实验的成功率更高。结论“酶解+差速贴壁”法能成功分离出乳鼠窦房结细胞,操作步骤简单,细胞损伤小、活性好,能更好地进行膜片钳实验研究。

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