PADRONIZA O DA T ‰CNICA DE PCR NA DETEC O DE Mycobacterium bovis DIRETAMENTE NO LEITE

O leite importante como fonte nutricional ao homem, bem como poss -vel via de transmiss ￡o de micobact rias, principalmente de Mycobacterium bovis. Neste estudo padronizou-se uma t cnica de PCR eficaz para detectar, diretamente no leite, o M. bovis. Para tal, leite tipo A foi inoculado artificialmente com n omero conhecido de M. bovis AN5, e dilui § μes sucessivas foram submetidas a dois protocolos de PCR para avaliar o limite de detec § ￡o de M. bovis. Em um dos protocolos foi empregado o par de primers INS1 e INS2 para detec § ￡o do Mycobacterium spp e no outro, o JB21 e JB22 espec -fico para M. bovis. As dilui § μes foram tamb m semeadas no meio de Stonebrink e estes incubados por at 90 dias a 37 °C, para determinar o n omero de bacilos vi veis inoculados no leite. Pelos resultados de PCR, o protocolo empregando o par de primer INS1 e INS2 foi menos sens -vel detectando bacilos at a dilui § ￡o 10-3 (800 UFC/mL). O par JB-21 e JB-22 detectou M. bovis at a dilui § ￡o 10-4 (80 UFC/ mL), sendo portanto mais sens -vel. Este m todo pode servir como ferramenta diagn 3stica de M. bovis em amostras de leite.