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ISSN: 2333-9721
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Cinética multiplicativa de clones de Crithidia fasciculata (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) en un sistema de cultivo in vitro MULTIPLICATIVE KINETICS OF Crithidia fasciculata (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) CLONES IN AN IN VITRO CULTURE SYSTEM

Keywords: Crithidia fasciulata , Trypanosoma cruzi , Trypanosomatidae , monogenic trypanosomatid

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Abstract:

La cinética multiplicativa de la cepa parental y cinco clones de Crithidia fasciculata (Kinetoplastida: Trypanosomatidae) fue estudiada en agar sangre 40% difásico. Los clones fueron obtenidos de cultivos en agar sangre 40% y denominados Ia, IIIa, IVa, Va y CAA. En cada caso, tubos de agar sangre 40% difásico con infusión cerebro corazón 3,7 % como fase líquida fueron inoculados con 103 coanomastigotos de cada clon y la cepa parental. La concentración de parásitos fue estimada semanalmente durante 12 semanas expresando las concentraciones en coanomastigotos/mm3. La variabilidad fue evaluada por análisis de variancia (ANDEVA) para mediciones repetidas (a:0,05) realizadas durante cada día de observación. Electroforesis en geles de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE) fueron también efectuadas para evaluar los perfiles proteicos de los clones y la cepa parental. Los resultados mostraron una fase de crecimiento logarítmico muy corta que antecedió a una fase estacionaria prolongada. (p > 0,05). No hubieron diferencias estasdísticamente significativas entre la concentración de coanomastigotos/mm3 entre los sistemas estudiados durante cada día de observación. Los perfiles proteicos mostraron patrones altamente homogéneos en todos los sistemas estudiados. Los resultados sugieren que las menores presiones evolutivas que sufre naturalmente C. fasciculata en su ciclo propagativo podrían estar relacionadas con la homogeneidad observada, pero es requerida más información en tópicos como inmunología, biología y genética para demostrar dicha homogeneidad The multiplicative kinetics in diphasic 40% blood-agar media was studied in five clones and the parental strain of Crithidia fasciculata (Kinetoplastida: Trypanosomatidae). The clones were obtained from cultures in 40% blood-agar and were named as Ia, IIIa, IVa, Va and CAA. In each case, diphasic blood agar media with brain heart infusion broth 3,7% was inoculated with 103 choanomastigotes. The concentration of parasites were estimated weekly during 12 weeks expressing these concentrations in choanomastigotes/mm3. The variability was evaluated by ANOVA tests for repeated measures (á:0,05). Electrophoresis in polyacrylamide gel with sodium dodecil sulfate (SDS-PAGE) was also performed to evaluate the protein profiles of the clones and parental strain. The results showed a short logaritmic growth phase before a long stationary phase. There were not significant statistical differences in the concentration of choanomastigotes/mm3 between the studied systems during each day of observation (p > 0,05). The

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