茶树尿苷二磷酸-葡萄糖-脱氢酶基因的克隆及其表达分析

目的 对参与多糖合成途径的茶树尿苷二磷酸-葡萄糖-脱氢酶基因（Camellia sinensis UDP-glucose-dehydrogenase gene，CsUGD）进行克隆、生物信息学分析、组织表达特异性分析及测定茶树不同器官组织多糖含量。方法 通过转录组数据获得茶树同源基因序列。利用ProtParam、TMpred、signalP、NetPhos、SMART、SSPro 4.0等在线软件进行生物信息学分析。VMD编辑CsUGD基因蛋白质三维结构；Jalview软件进行多序列比对；MEGA5.0构建系统进化树。采用qRT-PCR对不同器官组织进行基因表达差异分析，通过蒽酮硫酸比色法测定不同器官的多糖含量。结果 获得茶树CsUGD基因（MG366591）全长cDNA序列，该序列全长1 866 bp，编码480个氨基酸。CsUDP蛋白属于稳定亲水蛋白，不含信号肽，具有跨膜结构，并与柿树亲缘关系最近。荧光定量PCR显示，CsUGD在茶树的侧根中表达量最高；蒽酮硫酸比色法测定显示，在侧根中多糖含量最高。结论 首次从茶树中克隆出CsUGD基因，阐明该基因在茶树生长发育中的重要作用，在茶树多糖合成途径中起到关键作用，为茶树育种并提高茶叶药用价值提供科学依据