灰毡毛忍冬LmPAL1基因的克隆及表达分析

目的 克隆灰毡毛忍冬苯丙氨酸解氨酶（LmPAL1）基因全长序列，并进行生物信息学和表达模式分析。方法 提取灰毡毛忍冬花总RNA，通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和RACE技术克隆LmPAL1基因的全长cDNA序列；运用相关软件对该基因序列进行生物信息学分析；利用qRT-PCR测定灰毡毛忍冬茎、叶和不同花期花中该基因的相对表达量。结果 克隆的LmPAL1基因开放阅读框（ORF）长度为2 145 bp，编码714个氨基酸，生物信息学分析预测为亲水性蛋白，定位于叶绿体中，包含PAL shielding结构域（527~641 aa），并且含有PAL/HAL活性中心序列GTITASGDLVPLSYIAG（196~212 aa），与其他LmPAL1具有较高的相似度；LmPAL1基因qRT-PCR结果显示，7个花期材料以金黄色开花期相对表达量较高；与茎、叶比，白色花蕾期花的相对表达量最高，叶的最低。结论 成功克隆了LmPAL1基因，为进一步研究该基因的功能以及遗传改良灰毡毛忍冬品质奠定基础，同时为探究灰毡毛忍冬绿原酸生物合成和调节机制提供了依据