环糊精酶基因在毕赤酵母中的组成型表达

摘要： 为实现环糊精酶在毕赤酵母中的高效表达，以优化合成的环糊精酶基CGT2为基础，构建组成型表达质粒pGAPZαA-CGT2，运用电转化方法将目的基因整合进酵母染色体，构建环糊精酶酵母工程菌X33/pGAPZαA-CGT2，经摇瓶发酵120 h后，CGT2活力达0.21 U·mL-1；进一步对工程菌进行摇瓶发酵条件优化，确定其最优发酵条件为：pH6.5、28℃、200 r·min-1、每24 h 补加2.5%的甘油，120 h后其胞外酶活力达到0.36 U·mL-1，是优化前的1.7倍，实现了环糊精酶在毕赤酵母中的组成型表达