荚膜红细菌尿卟啉原Ⅲ转甲基酶的纯化及其酶学性质

S-腺苷-L-甲硫氨酸依赖型尿卟啉原Ⅲ转甲基酶 (S-adenosy-L-methionine uroprophyrinogen Ⅲ methyltransferase, SUMT) 催化尿卟啉原Ⅲ (Uroprophyrinogen Ⅲ, urogen Ⅲ)的中心碳原子C-2和C-7位上甲基化生成前咕啉-2，是维生素B12生物合成途径中的一步关键酶，但大部分SUMT受其底物urogen Ⅲ和副产物S-腺苷同型半胱氨酸 (S-adenosy-L-homocysteine, SAH) 的抑制作用。为了挖掘能耐受高浓度urogen Ⅲ的转甲基酶，文中从荚膜红细菌Rhodobacter capsulatus SB1003中克隆2个SUMT基因 (RCcobA1, RCcobA2)，经表达与纯化后，检测发现RCcobA1和RCcobA2的酶活分别为27.3 U/mg和68.9 U/mg，后者比VB12工业生产菌株脱氮假单胞菌Pseudomonas denitrificans中内源的SUMT (PDcobA，27.9 U/mg)高2.4倍，并且当urogen Ⅲ浓度高达70 μmol/L时都几乎不受抑制作用。因此，RCcobA2的发现可以为解除VB12合成途径的瓶颈以及提高VB12产量提供理论支持和方向指导