微流控芯片用于卵母细胞冷冻保存的实验研究

低温保存对卵母细胞造成渗透损伤、毒性损伤和冰晶损伤，使得细胞冻后质量难以提高．本文首次提出将微流控法添加-去除保护剂分别与三种冷冻载体(OPS、QC及Cryotop)搭配使用，对猪卵母细胞进行冷冻保存，并与传统冷冻法进行比较；然后，首次选用透明陶瓷和玻璃制作集成一体化芯片，对猪卵母细胞进行冷冻保存，以冷冻保存后的细胞存活率和发育率为判断依据，筛选出较好的方案；最后，对冻后卵母细胞的早期凋亡情况、胞内活性氧水平和线粒体膜电位水平进行分析．结果表明，微流控添加-去除保护剂组卵母细胞冻后存活率以及卵裂率都显著高于传统冷冻组，可以有效降低卵母细胞的早期凋亡率和胞内活性氧水平，减小线粒体损伤，提高细胞的冻后质量．透明陶瓷一体化芯片保存卵母细胞得到的存活率 和卵裂率与传统OPS冷冻的保存结果无显著差异．微流控芯片技术为卵母细胞的低温保存提供新的思路，有较好的应用前景