载柚皮苷复合支架对兔骨软骨缺损修复的实验研究

目的 探讨载柚皮苷复合支架的性能及其对兔骨软骨缺损修复的效果。 方法 利用 W/O/W 方法制备载柚皮苷和无载柚皮苷缓释微球；以凹凸棒石和 Ⅰ 型胶原蛋白为材料，通过“3 层夹心法”分别构建载柚皮苷、无载柚皮苷和载 TGF-β1 复合支架。分别利用体外缓释、扫描电镜和细胞计数试剂盒 8 法评价载柚皮苷微球的缓释效果、支架的形貌和细胞相容性。取 40 只日本大耳白兔随机分为 A、B、C、D 4 组，每组 10 只。于兔双侧股骨髁间窝处制备直径 4.5 mm、深 4 mm 的骨软骨缺损模型，A 组为缺损组（空白对照），B、C、D 组分别于骨软骨缺损处植入无载柚皮苷复合支架（阴性对照组）、载柚皮苷复合支架（实验组）及载 TGF-β1 复合支架（阳性对照组）。分别于术后 3、6 个月时取材，行大体、HE 染色、甲苯胺蓝染色，分别观察骨软骨缺损修复效果；Western blot 检测新生软骨 Ⅱ 型胶原蛋白表达水平。 结果 载柚皮苷微球具有良好的缓释效果；构建的骨软骨复合支架有较好的孔隙；载柚皮苷软骨层支架细胞的增殖率与无载柚皮苷支架比较明显增加，差异有统计学意义（P<0.05）。兔体内植入实验大体观察示，术后 3 个月 C、D 组缺损范围与 A、B 组相比明显缩小；术后 6 个月 C 组缺损处被新生软骨所覆盖，D 组新生软骨与周围正常软骨整合良好。组织学染色示，术后 3 个月 A、B 组缺损处被少量纤维组织填充，C、D 组可见少量软骨生成；术后 6 个月 C、D 组新生骨软骨组织与正常骨软骨类似，A、B 组缺损处以大量纤维组织为主。Western blot 检测示，术后 3、6 个月 C、D 组缺损处新生组织中 Ⅱ 型胶原蛋白表达量均显著高于 A、B 组，差异有统计学意义（P<0.05）；C、D 组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 载柚皮苷复合支架具有良好的组织相容性，并对兔关节骨软骨缺损有较好的修复效果