构建 KrasLSL-G12D/- 和 Smad4loxp/loxp 双转基因 散发性结直肠癌小鼠模型

目的 构建并验证一种与临床散发性结直肠癌类似且同时表达 KrasLSL-G12D/-和 Smad4loxp/loxp的双转基因小鼠模型。 方法 将 Krastm4Tyj/J 小鼠与 Smad4tm2.1Cxd/J 小鼠转换遗传背景后进行杂交建系，通过聚合酶链式反应技术鉴定子代小鼠基因型，获得基因型为 KrasLSL-G12D/-+Smad4loxp/loxp的双转基因小鼠模型。通过向双转基因模型小鼠的肠黏膜下注射 LentivirusCre-IRES-Luciferase，在 IVIS 系统下观察并统计双转基因模型小鼠的成瘤情况，对其瘤变组织进行取样并行苏木精-伊红染色法染色，以验证双转基因模型小鼠的成瘤能力。 结果 经培育筛选获得了能够同时表达 KrasLSL-G12D/-和 Smad4loxp/loxp的双转基因小鼠模型；通过构建的病毒载体利用 Cre 重组酶成功感染并诱导小鼠肠上皮细胞突变而形成癌灶。 结论 本研究构建的 KrasLSL-G12D/-+Smad4loxp/loxp双转基因模型小鼠的结肠上皮细胞能在 Cre 重组酶作用下诱导癌变，模拟了人类散发性结直肠癌的病理过程