重组人血清白蛋白体外诱导干细胞向心肌细胞的分化

目的 探讨植物源重组人血清白蛋白能否替代传统 B27 细胞培养添加剂作为基础培养基分化人多潜能干细胞为心肌细胞。 方法 人多潜能干细胞以 1.2×104个/cm2的细胞密度接种，汇合度达至 75% 后采用含有 0、50、100、200 g/L 不同浓度植物源重组人血清白蛋白的分化培养基对其进行诱导分化，在光学显微镜和荧光显微镜下记录干细胞向心肌分化的全过程。用流式细胞仪检测不同浓度植物源人血清重组白蛋白心肌细胞的分化效率。用免疫荧光染色检测心肌细胞特异性标志物 α-辅肌动蛋白（α-actinin）和心肌肌钙蛋白 T（cTnT）；用电镜观察人多潜能干细胞来源心肌细胞的超显微结构以及心肌细胞对药物的反应。 结果 大量的自发跳动心肌细胞在诱导分化第 9 d 左右出现，浓度为 200 g/L 的重组人血清白蛋白配成的心肌分化液的分化效率达 60.4%；跳动心肌细胞 α-actinin 和 cTnT 染色阳性，超显微结构有肌丝的存在，且对异丙肾上腺素和维拉帕米呈剂量依赖性。 结论 利用成分明确的、无动物源性的方法在体外诱导人多潜能干细胞分化为心肌细胞，分化效率达 60.4%，分化方法简单且低成本，可作为临床级别使用