泥鳅角蛋白18（K18）基因的克隆与表达分析

摘要 角蛋白18（K18）是角蛋白的一种，为中间纤维蛋白，是细胞骨架的组成部分。为了解泥鳅（Misgurnus anguillicaudatus）K18序列特征及其在不同组织中的表达，研究采用3'-和5'-RACE法克隆K18基因cDNA全长序列，并运用实时荧光定量PCR技术探讨其在不同组织中的表达。结果表明，泥鳅K18基因cDNA全长序列1 694 bp，其中包含开放阅读框1 299 bp，编码432个氨基酸，其序列具有Ⅰ型角蛋白序列DGKVVS，以及非常相似序列DNA（R/K）LAADDF。相似度分析显示，泥鳅K18与大鳞副泥鳅（Paramisgurnus dabryanus）的相似度最高为98%，与其它物种K18也存在不同程度的相似度。系统进化分析表明，泥鳅与其他物种的K18系统发育同源，且同陆生脊椎动物和硬骨鱼类同源，并与大鳞副泥鳅的关系最为密切。通过定量分析，K18基因在泥鳅肠、肌肉、心脏、胃、肝脏、精巢、卵巢、脾脏等8种组织都有表达，其中，肠表达最高，心脏最低。统计学分析表明，K18基因的表达在不同组织间存在显著性差异