工业蛋白水解酶快速检测方法的建立与初步应用

摘要 蛋白水解酶是一类重要的工业酶制剂,快速检测蛋白水解酶活力对新蛋白酶的发现、生产与应用极为重要。基于荧光共振能量转移原理,用氟硼荧荧光素标记大豆分离蛋白,以此为底物建立了一种快速检测蛋白水解酶活力的新方法。运用此方法检测5种工业蛋白酶,酶活在0.025~0.4 U/mL与荧光值呈现良好的线性关系,检测限范围为1.1×10-4~1.4×10-4 U/mL,定量限范围为3.7×10-4~4.5×10-4 U/mL,相比国标福林法灵敏度提高20 000倍以上。该方法灵敏度高、操作简便,在蛋白水解酶快速、微量检测及新型蛋白水解酶开发中具有应用潜力