木糖发酵酵母Pichia stipitis木糖还原酶基因XYL1在酿酒酵母中的表达

摘要 通过PCR方法克隆得到树干毕赤氏酵母木糖还原酶(XR)基因XYL1.将该基因连入酵母表达载体pYX212的强启动子磷酸丙糖异构酶(TPI)启动子下,得到融合表达载体pYX-XYL1.通过电转化方法将pYX-XYL1转入酿酒酵母Saccharonmyces cerevisiae W303-1A中,酶活测定表明,在酿酒酵母中树干毕赤氏酵母木糖还原酶(XR)基因XYL1得到活性表达,2酿酒酵母转化子粗酶液中木糖还原酶活分别为0.89U/mg(蛋白)和0.83U/mg(蛋白),为供体菌的1.5倍多.与基因供体菌不同,木糖还原酶基因在酿酒酵母中表达不需木糖诱导,为组成型表达.树干毕赤氏酵母木糖还原酶(XR)基因XYL1的成功表达为后续的利用木糖的酿酒酵母菌株的构建奠定了基础