GST-SUMO-MT融合蛋白在大肠杆菌中的自诱导表达

摘要 旨在考察在大肠杆菌中自诱导表达GST-SUMO-MT融合蛋白的可行性，并对自诱导培养条件及培养基成分进行优化，以提高蛋白产量。采用摇瓶培养，利用单因素和正交实验对工程菌自诱导的培养条件(诱导时间、诱导温度)和培养基组分(蛋白胨、酵母粉、甘油、葡萄糖、乳糖)进行优化，检测菌体浓度、可溶性目的蛋白的表达量。结果表明，自诱导培养基碳氮源的最优配比为：2% 蛋白胨、2% 酵母粉、0.3% 甘油、0.05% 葡萄糖和0.3% 乳糖。重组菌自诱导表达最优发酵条件为：采用两阶段温度控制，37℃培养3 h，25℃继续培养 13 h。此时可溶性目的蛋白的表达量和菌体浓度分别为 LB 培养基(IPTG 诱导)的 2.2倍和 2.3倍