云南萝芙木pnae 基因全长克隆及其序列分析

摘要 根据已知的其他物种PNAE 酶cDNA 序列设计引物，采用RT-PCR 技术从云南萝芙木叶片中扩增获得pnae 基因部 分cDNA 序列即PNAE 酶基因中间大片段，再用RACE 技术获得其两端序列。序列拼接得到完整的1 004 bp 的PNAE 酶基因，根 据获得的序列，分析得到795 bp 的开放阅读框，编码264 个氨基酸。序列分析显示，云南萝芙木中PNAE 酶氨基酸序列与蛇根木 中的该酶氨基酸序列同源性高达90%，但和其他植物物种中的PNAE 酶氨基酸序列，以及其他物种间的PNAE 酶氨基酸序列同源 性都不高，在40%-60% 之间，表明不同物种中PNAE 酶氨基酸序列不具有全序列的高度同源性。进一步序列分析发现，在各植物 的PNAE 酶氨基酸序列中都存在两个高度保守的氨基酸区域，表明不同物种中PNAE 酶存在共同的高度保守区段