鸡胚胎干细胞的体外培养和鉴定

摘要 从鸡X期胚胎中分离胚盘细胞，以小鼠胚胎成纤维细胞（mouse embryonic fibroblasts，MEF）为滋养层，高糖DMEM为基础培养基并添加10 ng/mL bFGF、20 ng/mL hIGF-1、2 ng/mL mSCF、2 ng/mL hIL-11和1 000 U/mL LIF等细胞因子对细胞进行培养，获得典型的呈集落生长的鸡胚胎干细胞（chicken embryonic stem cells，cESCs）克隆。免疫组化显示，呈集落生长的cESCs克隆具有较高的内源性AKP活性并表达多能性标志SSEA-1和Oct-4。RT-PCR分析进一步证实其表达cESCs特异性基因cENS-1。结果表明，该培养体系可用于cESCs的分离并维持其在体外生长并保持未分化状态