一种简易的甘蔗叶组织PCR模板制备方法

摘要 以转基因甘蔗叶片为材料, 少量嫩叶经碱并短暂高温处理, 再中和, 形成裂解混合物。直接以此为模板, 转基因甘蔗外源基因bar、KP4、Cry1Ac-2A-gna融合基因及内源基因Shactin基因为靶基因, PCR扩增结果稳定、准确、重复性强, 完全可以达到常规CTAB法提取的DNA扩增效果。用此方法制备的模板室温下2周之内, 4℃、-20℃下一个月之内结果不变。经多种外源基因PCR反应的反复验证, 证实了这种方法在转基因甘蔗检测中的广泛适用性。该方法快速制备PCR模板, 无需DNA提取过程, 具有使用样品量少, 成本低、简便、快捷等优点