共表达透明颤菌血红蛋白对毕赤酵母产Β-甘露聚糖酶发酵过程的影响

摘要 为了改善高密度发酵生产Β-甘露聚糖酶过程中的溶氧限制，提高Β-甘露聚糖酶产量，将VHb和Β--甘露聚糖酶基因置于AOX1启动子调控之下，进行VHb和Β--甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的共表达。经密码子优化合成VHb基因，插入表达载体pPICZαA，整合到Β--甘露聚糖酶工程菌中，通过G418和Zeocin抗性筛选共表达VHb基因的重组酵母工程菌。在30 L发酵罐水平上分析共表达VHb菌株(VHb+)与初始菌株(VHb-)对Β--甘露聚糖酶表达的差异。结果显示，限氧条件下，VHb+菌株的Β--甘露聚糖酶的表达量比对照菌株VH b-高90%，且透明颤菌血红蛋白提高了甲醇耐受性，缩短发酵周期约40 h