改良直接贴壁法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞及其鉴定

摘要 目的 观察并鉴定兔骨髓间充质干细胞生物特性,建立一套简单、高效的培养方法。方法 采用直接贴壁法分离培养兔骨髓间充质干细胞,倒置显微镜下观察其形态。MTT法测定其增殖水平并绘制其生长曲线。流式细胞仪测定第三代骨髓间充质干细胞表型。结果 细胞培养第5 d,镜下见细胞呈小集落生长,形态呈多边形;7~8 d小集落融合成大集落,10 d左右可传代。第二代细胞镜下呈梭形成纤维样细胞,即间充质干细胞;细胞生长曲线成S形;流式细胞仪检测细胞表达CD 73、CD 90、CD 105、不表达CD 34、CD 45。结论 改良直接贴壁法可获得大量、纯化、稳定的间充质干细胞