解淀粉芽孢杆菌草酸脱羧酶基因的克隆、 原核表达与活力测定

为进一步明确解淀粉芽孢杆菌C(10)的草酸脱羧酶基因的生物功能，克隆其关键基因对该基因进行原核表达。通过PCR技术克隆了淀粉芽孢杆菌C(10)的草酸脱羧酶基因，构建了原核生物表达载体pET28a-Baoxdc，对其进行表达与纯化。结果表明，扩增所获解淀粉芽孢杆菌C(10)的草酸脱羧酶全基因序列全长为1 161 bp，在大肠杆菌中进行表达，添加诱导剂IPTG、MnCl2至终浓度分别为0.6、6 mmol/L，诱导4 h时的酶活力和比活力最高，分别为3？？793 2 U/mL和3.145 3 U/mg