濒危植物蒙古扁桃SRAP反应体系优化

为利用SRAP技术研究蒙古扁桃资源遗传多样性评价和种质资源鉴定，利用正交试验法L16(45)正交设计，对影响蒙古扁桃SRAP-PCR反应体系的Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶量、引物浓度4个因素以及模板DNA浓度进行筛选。优化的蒙古扁桃SRAP-PCR最佳反应体系为Mg2+浓度为2.5 mmol/L，dNTPs浓度为 0.25 mmol/L，模板DNA浓度为100 ng，Taq酶浓度为2.00 U，引物浓度1.0 μmol/L，2.5 μL 10×PCR buffer，总体积为25 μL。筛选结果表明，对蒙古扁桃SRAP-PCR扩增结果影响最大的是Taq聚合酶浓度，最小的是dNTPs浓度。运用该体系对144个随机SRAP引物组合进行筛选，筛选出12个条带清晰、多态性高的引物组合，为蒙古扁桃种质资源的研究奠定了基础