柱前衍生-固相萃取-高效液相色谱荧光测定生物脱氮反应器中痕量信号分子AI-2

为揭示污水生物脱氮工艺中污泥菌群间的群体感应作用，建立了柱前衍生-固相萃取-高效液相色谱荧光检测法(HPLC-FLD)定量检测介导细菌种间群体感应信号分子AI-2的方法。取反应器的泥水混合液，经0.45 μm滤膜过滤后，用氨基磺酸掩蔽亚硝酸盐干扰，并与2,3-二氨基萘(DAN)发生衍生化反应，衍生化产物用C18固相萃取柱进行固相萃取，经氮吹浓缩后上机分析。采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)进行分离，乙腈与水(含0.1%甲酸)作为流动相进行梯度洗脱，使用荧光检测器(激发和发射波长分别为271 nm和503 nm)进行检测。结果表明，该检测方法在1~200 ng·mL-1范围内呈现出了良好的线性关系，检出限为1 ng·mL-1，回收率为55.08%~59.25%，相对标准误差为2.98%~10.41%。该方法适用于杂质干扰多的痕量信号分子AI-2 定量分析，可为生物脱氮工艺中信号分子AI-2介导群体感应研究提供有效的分析方法