响应面法优化中性蛋白酶提取苦竹花多糖及多糖性质分析

目的：采用响应面法优化中性蛋白酶辅助提取苦竹花多糖的最优条件，并对提取得到的粗多糖进行分离纯化、理化性质及体外抗氧化性测定。方法：在单因素试验基础上，考察提取时间、酶添加量、提取温度对苦竹花粗多糖得率的影响。利用响应面试验建立数学模型，确定最佳提取条件。苦竹花粗多糖经分离纯化，获取2?个组分，分别命名为SBH-1和SBH-2，其中以SBH-1为主要组分。通过高效凝胶渗透色谱和红外光谱对SBH-1组分进行单糖组成、分子质量及初步的结构研究。通过与VC对比，研究苦竹花粗多糖SBH-1的体外抗氧化活性，即1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率及抗脂质过氧化能力的测定。结果：在中性蛋白酶添加量0.83%，提取温度46.68?℃，提取时间115.95?min条件下，粗多糖得率为7.63%。经检测苦竹花粗多糖SBH-1组分分子质量为18.3?kD，主要由甘露糖（Man）、葡萄糖（Glc）、半乳糖（Gal）3?种单糖组成比例为1.3∶2.3∶1.2。SBH-1对DPPH自由基和超氧阴离子自由基清除EC50分别为2.03?mg/mL和1.038?mg/mL。结论：采用中性蛋白酶辅助提取得到的苦竹花粗多糖简单易行，纯化得到的中性杂多糖SBH-1具有很好的活性，为进一步研究和开发提供理论基础