葡萄籽原花青素对顺铂诱导小鼠睾丸支持细胞TM4细胞凋亡的影响

目的：研究葡萄籽原花青素（grape seed proanthocyanidin extract，GSPE）对顺铂（cisdichlorodiamineplatinum (II)，cDDP）诱导小鼠睾丸支持细胞（TM4）细胞凋亡、细胞凋亡形态及凋亡相关基因蛋白表达的影响。方法：体外培养正常TM4细胞，将实验细胞分为空白对照组、cDDP组（0.014 mg/mL）、GSPE（0.005 mg/mL）＋cDDP组（0.014 mg/mL）、GSPE组（0.005 mg/mL）。流式细胞检测法测定GSPE对cDDP诱导TM4细胞凋亡率的影响，Hoechst染液染色法测定TM4细胞凋亡的形态学变化，Western blot蛋白免疫印迹法测定凋亡相关基因蛋白表达情况。结果：cDDP可显著增加TM4细胞凋亡，显著降低TM4细胞Bcl-2表达量以及处于酶原状态Pro-caspase3表达量，而明显增加TM4细胞Bax表达量，同时增加处于激活状态的Caspase-3表达量。GSPE可明显降低cDDP诱导的TM4细胞凋亡，降低Bax以及Caspase-3表达量，增加Bcl-2和Pro-caspase3表达量。结论：细胞凋亡在cDDP诱导TM4细胞毒性过程中起重要作用。Bcl-2、Bax、Caspase-3等蛋白参与cDDP诱导TM4细胞凋亡，GSPE通过抑制Bax及Caspase-3的蛋白表达及增强Bcl-2和Pro-caspase3的表达来阻抑cDDP诱导TM4细胞的凋亡，从而减轻cDDP诱导TM4细胞损伤