玉米半胱氨酸蛋白酶的真核表达及酶学性质表征

玉米半胱氨酸蛋白酶是一种重要的蛋白水解酶，作为C1家族蛋白酶的一员，可在食品、医药等领域广泛应用。本研究从玉米幼苗中提取总RNA，反转录扩增得到玉米半胱氨酸蛋白酶基因，进而构建重组真核表达载体pPICZα-zmCP1，转化毕赤酵母GS115构建重组菌。对表达的玉米半胱氨酸蛋白酶进行酶学性质研究，结果表明该酶最适反应温度为55 ℃，最适反应pH值为6.0，具有较好的热稳定性和有机溶剂抗性，但是pH值的稳定性、金属离子耐受性表现一般。底物特异性研究发现，该酶对小分子底物具有较强的水解能力，且偏爱P1位点为精氨酸的底物