一种基于多重实时荧光聚合酶链式反应熔解曲线分析的肉及肉制品掺假鉴别方法

为实现肉及肉制品掺假快速鉴别，分别以猪、牛线粒体DNA的COXⅠ，绵羊、山羊、狗、狐狸、貉线粒体DNA的16S rRNA及鸡、鸭线粒体DNA的12S rRNA基因为靶位点，设计扩增产物熔解温度（Tm值）具有显著性差异的特异性引物，建立一种用于快速鉴别肉或肉制品中猪、牛、绵羊、山羊、鸡、鸭、狗、狐、貉9?种源性成分的5重实时荧光聚合酶链式反应熔解曲线分析方法，通过特异性、灵敏度及市售样品的检测，对该方法进行检验和评价。结果表明：方法具有良好的特异性及灵敏度，单物种DNA检出限为0.001～1?ng，多物种混合DNA检出限均为0.1?ng，通过市售样品检测表明该方法可用于实际样品（包括生鲜样品和熟制样品）掺假的快速鉴别