水稻可溶性糖蛋白的纯化与鉴定研究

摘要： 从水稻鲜叶中提取总蛋白，对总蛋白中的蛋白质含量进行了测定；通过硫酸铵沉淀将总蛋白提取液进行分级，从而达到了总蛋白细分和放量的目的。四级份的分级蛋白分别通过ConA-Sepharose 4B 亲和层析进行糖蛋白纯化，按吸收峰收集的各级糖蛋白混合物进行冷冻干燥，得到干粉；结合PAS法染色和考马斯亮蓝R-250染色对四级份的糖蛋白样品鉴定，在其中3个级份中均检测出糖蛋白；由于感度的差异，按考马斯亮蓝R-250染色可检测出近30种糖蛋白(包括部分糖肽)，按PAS法染色可检测到7种糖蛋白；对3种含量较高的糖蛋白进行了胶上纯化，3种糖蛋白的PAS法染色均证实了3种样品为单一的糖蛋白或者糖肽，分别命名为RG1、RG2和RG3