利用mRNA差异显示技术分离甜菜M14品系特异表达基因的cDNA片段

摘要： 二倍体栽培甜菜与白花甜菜杂交、进一步回交而获得的单体附加系M14，其染色体组成中除了含有18条栽培甜菜染色体外，还附加有一条野生白花甜菜第9号染色体，该附加染色体通过母本的传递率为96.5%；单体附加系传递率如此高的原因是因为M14中有无融合生殖基因的存在。本实验采用mRNA差异展示技术对甜菜无融合生殖品系M14和正常有性生殖的二倍体栽培甜菜A2Y花蕾减数分裂时期的基因表达进行了差异分析。采用GT15A，GT15G，GT15C 3种锚定引物，共筛选了20个随机引物，通过RT-PCR检测，获得了6个阳性差异表达的cDNA片段，应用NCBI的BLASTx软件对测序结果进行同源序列、相似序列检索,为进一步克隆无融合生殖基因提供侯选cDNA片段