清开灵对小胶质细胞缺氧活化诱导的脑微血管内皮细胞Toll样受体4、gp91phox和闭锁小带蛋白-1表达的影响

摘要： 目的 探讨清开灵注射液抑制小胶质细胞缺氧活化后，脑微血管内皮细胞Toll样受体4 (TLR4)、gp91phox和闭锁小带蛋白-1 (ZO-1)的表达。方法 小鼠BV2小胶质细胞分为6组。正常组和模型组用无血清DMEM培养基培养，低、中、高浓度清开灵组用含清开灵注射液0.0625%、0.125%和0.25%的无血清DMEM培养基培养，米诺环素组用含米诺环素200 nmol/L的无血清DMEM培养基培养。除正常组外，其余各组缺氧24 h后复氧24 h，各组培养液分别加入Balb/c内皮细胞培养液中培养24 h。CCK-8检测内皮细胞活力，比色法检测一氧化氮浓度，Western blotting检测共培养模型内皮细胞TLR4、gp91phox和ZO-1表达。结果 与正常组比较，模型组细胞存活率和ZO-1蛋白的表达明显降低( P < 0.01)，一氧化氮浓度、TLR4和gp91phox蛋白表达升高( P < 0.05)；与模型组比较，各清开灵组和米诺环素组细胞存活率和ZO-1蛋白表达升高( P < 0.05)，一氧化氮浓度、gp91phox和TLR4蛋白表达降低( P < 0.05)。结论 清开灵注射液可通过抑制小胶质细胞缺氧活化，降低脑微血管内皮细胞TLR4和gp91phox蛋白表达，提高ZO-1蛋白表达，提高脑微血管内皮细胞的生存和功能