胚胎大鼠脑和脊髓神经干细胞的分离和培养

研究采用显微解剖、无血清细胞培养和免疫荧光细胞化学染色等实验技术，成功地建立了胚胎大鼠脑不脊髓神经干细胞(NSCs)的分离和培养方法。结果显示，(z)在含成纤维细胞生长因子一2 ( FGF-2)和表皮生长因子( E(3F)的无血清培养液中，两种来源的NS。经体外培养8一10代后，其细胞数呈指数级增加，其中脑来源的NSCs由原代培养时的1 x 106增加至1x1012,脊髓来源的NS Cs数从1 x 106增加至1 x 101,。增殖的细胞表达神经上皮干自 胞蛋白(nestin) ; (2)在含1%胎牛血清(FBS)的培养条件下，它们都能被诱导分化为神经元、少突胶质细胞和星型庄质细胞。但其分化比例可随细胞传代次数的增加而改变，其中，大脑来源的NSCs分化为神经元的比例从第二代(P2的11.95士2. 5%下降至第五代(几)的1.97士1.16%(P<0.01)，而少突胶质细胞的分化比例则基本保持不变，这一分化格局同样可在脊髓来源的NSCs中发现。结果表明，我们所分离和培养的细胞在体外经多次传代后仍具有很强白增殖能力和多向分化潜能，它们都表达nestin，属于中枢神经系统的干细胞。