外周神经损伤小鼠不同脊髓节段小胶质细胞和星形胶质细胞的激活状态

脊髓小胶质细胞和星形胶质细胞在外周神经损伤引起的痛行为敏化中发挥重要作用。但是，神经损伤引起的胶质细胞激活在脊髓背角的空间分布尚不清楚。本文采用坐骨神经慢性压迫(chronic constriction injury, CCI)模型，研究了神经病理性疼痛小鼠之颈、胸、腰、骶段脊髓背角胶质细胞的激活状态。采用von Frey方法测定CX3CR1YFP、GFAPYFP转基因小鼠和野生型(wild type, WT)小鼠CCI模型组和假手术组小鼠后爪对机械刺激反应的阈值。免疫荧光标记方法用于检测脊髓背角小胶质细胞和星形胶质细胞的激活状态。结果显示，野生型、CX3CR1YFP和GFAPYFP小鼠在CCI术后3天，术侧后爪均出现明显的触诱发痛，即von Frey刺激引起的缩腿反应阈值(paw withdrawal threshold, PWT)与非手术侧和假手术组动物后爪相比显著下降，并且一直持续到术后第14天；CCI术后14天，CX3CR1YFP小鼠术侧腰段脊髓背角CX3CR1YFP-GFP免疫荧光强度明显增高(P < 0.01, n = 6)，其他各节段无明显改变；GFAPYFP小鼠术侧胸段、腰段和骶段脊髓背角GFAPYFP-GFP免疫荧光强度均显著增高；小胶质细胞和星形胶质细胞的激活情况在WT小鼠Iba-1和GFAP免疫荧光组织化学染色中得到进一步证实；CX3CR1YFP- GFP和GFAPYFP-GFP免疫荧光信号分别与小胶质细胞标志物Iba-1和星形胶质细胞标志物GFAP共定位；WT小鼠CCI术后3天，术侧胸、腰和骶段脊髓背角Iba-1表达水平均明显上调，但GFAP上调仅发生在脊髓腰段。上述结果表明，较为广泛的脊髓小胶质细胞和星形胶质细胞激活分别发生在痛觉敏化的早期和维持期，提示脊髓小胶质细胞和星形胶质细胞的激活可能分别与继发性痛觉敏化的产生和维持相关。