心肌细胞核钙调素Ⅰ介导的bcl-2转录调节在大鼠心肌肥厚中的作用

为探讨心肌细胞核钙调素Ⅰ(calmodulinⅠ, CaMⅠ)介导的{sl bcl--2}转录调节在大鼠心肌肥厚中的作用及其可能机制， 实验随机分为对照组和心肌肥厚组，采用腹主动脉缩窄法制备大鼠心肌肥厚模型。模型复制成功后 4周，以改良差速离心和密度梯度离心提取并纯化细胞核；蛋白印迹法测定心肌细胞核 cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response--element binding protein, CREB)及磷酸化CREB (phosphorylated cAMP response--element binding protein, pCREB)表达；免疫组化法观察左室心肌组织CaMⅠ蛋白表达及分布；延续转录分析法观察阻断CaMⅠ后心肌细胞核 {sl bcl--2} mRNA的变化。结果表明，心肌肥厚组pCREB蛋白表达较对照组明显增加({sl P}<0.05)，CREB蛋白表达无明显变化({sl P}>0.05); CaMⅠ分布于细胞核及细胞浆，心肌肥厚组CaMⅠ蛋白表达较对照组明显增加( {sl P}<0.05); 使用CaM抑制剂后心肌细胞核{sl bcl--2} mRNA表达明显上调({sl P}<0.05)。结果提示，压力超负荷时心肌细胞核内CaMⅠ激活，抗凋亡基因{sl bcl--2}表达下调，核转录因子CREB磷酸化增加，但CREB 在调节{sl bcl--2}基因转录过程中可能发挥次要作用。