重组表达天冬氨酸-β-脱羧酶及其酶学性质

天冬氨酸-β-脱羧酶能以L-天冬氨酸为底物脱羧生成L-丙氨酸。本文利用pETDuet-1为载体在宿主细胞E. coli BL21(DE3)中重组表达了粪产碱菌（Alcaligenes faecalis）来源的天冬氨酸-β-脱羧酶（Asd），研究了其酶学性质，考察了pH、pH稳定性、温度、热稳定性、底物浓度对酶活的影响。结果表明：天冬氨酸-β-脱羧酶重组表达成功；最适反应温度和pH为45℃和6.0；动力学常数Km和Vmax分别为0.72 mmol/L和10.52 mol/(L?min?g)。0.1 g菌体细胞在10 mL 0.2 mol/L磷酸缓冲溶液中催化2.0 g L-天冬氨酸，40℃，pH=6.0反应15 h，L-天冬氨酸的摩尔转化率达到99%