黄河裸裂尻鱼肌酸激酶M-CK cDNA的克隆及组织表达分析

肌酸激酶（Creatine kinase, CK）能够催化在二磷酸腺苷ADP和磷酸肌酸之间磷酸基的可逆性转移，在细胞能量代谢过程中发挥重要作用。本研究利用RT-PCR和RACE方法克隆了黄河裸裂尻鱼（Schizopygopsis pylzovi）肌酸激酶基因全长cDNA序列，并进行了生物信息学分析和系统发育关系研究。结果表明，黄河裸裂尻鱼肌酸激酶cDNA全长为1599 bp，开放阅读框（ORF）长1143bp，编码380个氨基酸，具有典型的N-端结构域和C-端催化结构域。氨基酸序列同源性分析表明，黄河裸裂尻鱼肌酸激酶与斑马鱼和鲤M3-CK有较高的同源性，其序列一致度达94%以上。系统发育分析显示，黄河裸裂尻鱼肌酸激酶与斑马鱼和鲤的M3-CK聚在一支，形成一个单系群，初步判定克隆获得的黄河裸裂尻鱼肌酸激酶基因可能是鲤和斑马鱼M3-CK的直系同源基因。利用Real-time PCR方法检测和分析了主要组织肌酸激酶mRNA表达水平，结果表明黄河裸裂尻鱼肌肉、肠、眼、心脏中肌酸激酶转录本表达较高，在肝胰脏和脑中表达微弱。肌酸激酶在肌肉、肠、和心脏中高表达与其能量代谢功能相适应，而在眼组织中的高表达是否与肌酸激酶的其他功能相关，有待于进一步研究