芹菜素对自杀基因治疗系统杀伤人黑色素瘤细胞株A375的增效作用

摘要：【目的】研究芹菜素对HSV-tk/GCV自杀基因杀伤人黑色素瘤细胞株A375的增效作用及其机制。【方法】采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测芹菜素对A375细胞生长的影响，并确定芹菜素的用药剂量，及自杀基因治疗系统联合芹菜素对1：4混合A375-tk/GFP（tk ）、A375（tk-）混合细胞的旁观者效应的影响，荧光显微镜观察及流式细胞仪荧光示踪法分析GJIC功能、细胞凋亡变化。【结果】芹菜素用A375细胞24、48、72h的IC50分别为86.34、25.81、11.16μmol/L，选用2.5~20μmol/L芹菜素进行后续试验；5、10、20μmol/L芹菜素联合tk/GCV组对肿瘤细胞的抑制率明显比单药组和单纯tk/GCV组高（P<0.05），Q值分别为2.03、1.43和1.36；2.5、5、10μmol/L芹菜素处理A375细胞48h后，各组绿色荧光细胞比值为：0.156±0.034、0.333±0.003、0.393±0.006、1.105±0.094，芹菜素各浓度组比值均明显高于空白对照组（P<0.001）；芹菜素联合tk/GCV各组，与对照组、tk/GCV组、单药组比较，可以增加细胞晚期凋亡率，趋势与MTT结果一致。【结论】芹菜素可以提高tk＋和tk－混合细胞对GCV的敏感性，协同性增强tk/GCV系统杀伤效应的作用，其机制可能与芹菜素能够促进A375细胞GJIC传输功能和诱导细胞凋亡有关