神经干细胞迁移研究平台的建立及补阳还五汤的干预影响

目的：建立体外神经干细胞（neural stem cells，NSCs）迁移研究的平台，并通过经典名方补阳还五汤对此平台进行适用性验证。方法：分离、培养大鼠脑胚胎NSCs，利用NSCs放射性迁移、划痕修复动态检测以及Transwell趋化性迁移检测的方法，建立体外NSCs迁移研究平台。利用此平台评价经典名方补阳还五汤（300，600 mg·L-1），有效单体川芎嗪（10，50 mg·L-1）以及阳性对照基质细胞衍生因子-1（stromal-derived factor 1，SDF-1）等对NSCs迁移的影响。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测放射性迁移系统及Transwell培养上清液中SDF-1及血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的含量。结果：经过不同时间点的观察，放射性迁移、划痕修复动态检测以及Transwell趋化性迁移均可见不同程度的NSCs的迁移；与空白组比较，补阳还五汤及川芎嗪能够明显促进放射性迁移体系中NSCs的迁移，还能够显著增加向Transwell下室迁移的细胞数，且具有剂量依赖性（P<0.05，P<0.01），此外还可显著提高NSCs培养上清中SDF-1，VEGF的含量（P<0.01），其中对SDF-1含量上调作用高于VEGF；给予AMD3100预处理后，600 mg·L-1补阳还五汤及10，50 mg·L-1川芎嗪促进Transwell向下室迁移的细胞数显著降低。结论：该研究建立的NSCs迁移研究平台动态、多维，能模拟不同临床病理生理过程，且经济实用、简便易行，可供中药复方和单体成分活性筛选之用