腺苷脱氨酶抑制剂快速筛选模型的建立

目的 建立腺苷脱氨酶(adenosine deaminase，ADA)抑制剂的快速筛选模型。方法 采用ADA酶，以腺苷为底物，2'-脱氧助间型霉素作为抑制剂验证反应体系，通过紫外分光光度法检测，优化反应条件，并对248种中药提取物及其内生菌发酵产物进行筛选。结果 建立了最佳模型方案为：pH 7.5的PBS缓冲液体系，底物浓度为腺苷200 μg?mL-1，ADA酶浓度55 IU?mL-1，连续检测腺苷在265 nm下OD值动态变化情况。此模型可以用于ADA酶抑制剂的快速筛选，且基于此模型共筛选获得23个有一定活性的粗提物。结论 本实验建立的体系可以为ADA酶抑制剂的筛选提供简单易行、稳定、可靠的研究平台