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- 2018
RNA干扰沉默钙蛋白酶1对口腔鳞状细胞癌细胞株HSC3增殖和迁移的影响
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Abstract:
摘要 目的:探究RNA干扰使钙蛋白酶1(calpain 1)沉默后,对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞株HSC3增殖和迁移的影响。方法:将calpain 1基因的siRNA表达载体(siRNA-calpain 1),瞬时转染至HSC3中。应用MTT法比较转染后细胞增殖情况;应用流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况;应用Transwell测定评估细胞迁移和侵袭能力;应用蛋白免疫印迹检测细胞内TGF-β RII、Vimentin、Smad2、Smad3、磷酸化Smad2/3、E-cadherin、N-cadherin、MMP-2、MMP-9蛋白表达。结果:与NOKSI细胞系相比,HSC3细胞系中calpain 1表达显著增加(P＜0.05)。与Blank组和si-NC组相比,si-calpain 1 组calpain 1 表达均显著降低(P＜0.05)。与si-NC组相比,在转染si-calpain1后48 h、76 h和96 h,si-calpain 1组细胞活力均显著降低(P＜0.05);si-calpain 1组G0/G1期细胞比例显著增加,S期细胞比例显著降低(P＜0.05);si-calpain 1组细胞内E-cadherin表达显著增加,而cyclin-D1、cyclin-E、Vimentin、N-cadherin、MMP-2、MMP-9、TGF-β RII、Smad2、Smad3、p-Smad2/3蛋白表达均显著降低(P＜0.05)。结论:siRNA沉默calpain 1基因能够通过使细胞周期G0/G1停滞而抑制细胞增殖,并通过抑制MMPs及EMT来抑制细胞迁移和侵袭,这一过程涉及TGF-β/Smad信号通路
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