葡萄球菌核酸酶的制备及性质研究

为获得纯度较高的葡萄球菌核酸酶(SNase)以研究其与糖尿病的关系，构建基因工程表达菌E.coli BL21/pET28a-His-SNase，诱导其表达可溶性胞外蛋白，并对纯化的SNase进行初步性质研究。采用分子生物学方法设计和构建含有SNase基因的表达载体pET28a-His-SNase，再转入E.coli BL21(DE3)感受态细胞。经过乳糖诱导表达、超声破碎及镍柱亲和色谱等纯化步骤后，以SDS-PAGE和Western blot鉴定His-SNase，并对其性质进行了初步研究。结果表明，乳糖诱导后His-SNase能高效表达，亲和色谱后纯度高达85%以上，且其具备较高的核酸酶活性，作用pH范围较广，有很好的耐热性。本研究为进一步探究葡萄球菌核酸酶与糖尿病的关系奠定了基础