用于植物基因研究的mCherry表达载体构建及定位表达
Construction and Expression of mCherry Expression Vector Used in Plant

荧光蛋白在生物学研究中具有广泛的应用和重要的作用，其中红色荧光蛋白mCherry因其颜色和良好的特性，对于植物基因研究具有重要的使用价值，本研究将mCherry基因构建到pBI121植物表达载体系统中，构建了pBI121MCS-mCherry载体。利用基因枪转化法转入洋葱表皮进行表达验证，显微镜观察结果显示整个洋葱细胞具有红色荧光，证明该载体能够在植物细胞中表达红色荧光蛋白。利用双酶切连接法将转录因子BpMYB4基因构建到该载体上，得到融合表达载体pBI121MCS-mCherry-BpMYB4，在洋葱表皮中表达，结果显示细胞核具有红色荧光，证明该载体能够准确表达融合蛋白，进行亚细胞定位。同时融合基因时不再需要中间载体，构建简便，引入的KpnⅠ酶切位点，增加了可选择性。因此该载体可用于植物基因表达定位及转基因植株筛选研究中，为今后的白桦基因组学研究提供了材料。